实验一 普通光学显微镜的使用和临时装片的制作
一、实验目的
1、学会临时装片的制作；了解真核细胞的基本结构及动物细胞与植物细胞之间的主要区别；
2、了解普通光学显微镜各部分的结构和原理；学会正确使用光学显微镜；
3、了解生物作图的方法，初步掌握徒手作图的技术。
二、实验材料及仪器
试剂：0.9%NaCl溶液、0.1%亚甲基兰溶液、蒸馏水
仪器：普通光学显微镜
材料：洋葱、擦镜纸、吸水纸、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、牙签、标签纸、记号笔
实验步骤
（一）临时装片的制作
1、洋葱鳞茎表皮细胞临时装片的制作
（1）滴：在载玻片中央滴一滴蒸馏水；
（2）撕：取洋葱鳞片叶内表皮，用刀片在其内表皮割一个小方块（边长2-3mm），用镊子夹住迅速撕下一条透明、薄膜状的表皮，；
（3）展：迅速放在玻片上的水滴中，用镊子或解剖针轻轻将其展平；
（4）盖：将盖玻片的一边先接触水滴，再轻轻盖下；
（5）吸：用吸水纸将多余的水分吸去，制成临时装片，用标签纸注明。
2、人口腔上皮细胞临时装片的制作
（1）刮：用牙签在自己口腔颊内轻刮几下；
（2）涂：将刮下的粘液薄而均匀地涂在玻片上；
（3）滴：加一滴生理盐水；
（4）盖：将盖玻片的一边先接触生理盐水，再轻轻盖下；
（5）染：在盖玻片一侧加一滴亚甲基兰染液；
（6）吸：另一侧用吸水纸吸引，把染液引至标本上，染色1-2分钟，镜检。
（二）学习生物绘图的方法
1.生物绘图的要求
（1）生物绘图首先要具有高度的科学性，不得有科学性错误。形态结构要准确，比例要正确，要有真实感，立体感，精细而美观。
（2）图面要力求整洁，铅笔要保持尖锐，尽量少用橡皮。
（3）绘图的线条要光滑、匀称，点要大小一致。
（4）绘图大小要适宜，位置略偏左，右边留着注图。
（5）图注要完善，字体用正楷，大小要均匀，不能潦草。注图线用直尺画出，间隔要均匀，且一般多向右边引出，图注部分接近时可用折线，但注图线之间不能交叉，图注要尽量排列整齐。
（6）绘图完成后在绘图纸上方要写明实验名称、班级、姓名、时间，在图的下方要注明图名及放大倍数。
2.生物绘图的方法
生物绘图最常见的是点点衬阴法。点点衬阴法即将图形画出后，用铅笔点圆点，以表示明暗和深浅,，给予立体感。在暗处点要密，明处要疏，但要求点要均匀，点点要从明处点起，一行行交互着点，物体上的斑纹描出再点点衬阴。
3.生物绘图的步骤
（1）绘图前要认真观察标本，搞清实物标本的结构特点，切忌抄书或平空想象。
（2）用HB铅笔轻轻将图轮廓画出，作为草图要掌握好比例和位置。
（3）在草图的基础上绘详图，此时要用2H和3H铅笔，线条要流畅，点要匀称，点线不要重复描绘。
（4）按注图要求注图，写上图名及班级、姓名等。
（三）普通光学显微镜的使用
1.结构：分为机械部分和光学部分
机械部分：镜座、镜臂、双目镜筒座、物镜转换器、载物台、调节器（粗准焦螺旋、细准焦螺旋）、聚光镜调焦手轮、电源开关、亮度调节钮
光学部分：目镜、物镜、聚光镜、光源
普通光学显微镜结构示意图
2.显微镜的使用
（1）换片
降下载物台-换片-逆时针转到4倍物镜-升载物台-粗调焦-顺时针转至10倍物镜-粗调焦-细调焦-顺时针转至40倍物镜-细调焦-观察-降下载物台-换片
（2）关机
a.旋转粗准焦将载物台降到最低
b.4倍物镜对准通光孔
c.将光源调至最小，关闭电源，拔下两个插头
d.罩好机罩，椅子放桌子下面
四．作业
1.绘图：洋葱鳞茎表皮细胞、人口腔上皮细胞
2.完成实验报告
注：实验报告中需包括实验目的、实验材料与仪器、实验步骤（可缩减）、作业以及本次实验自己的收获与体会。
实验二 动物组织切片的观察
实验目的
了解动物的上皮组织、结缔组织、肌肉组织和神经组织的形态结构；了解四大组织的结构是如何与其功能相适应的。
实验内容
1．在光学显微镜下观察四种组织的形态结构
2．绘图
实验器材和材料
显微镜，显微镜照相系统，单层扁平上皮装片，复层扁平上皮装片，疏松结缔组织装片，致密结缔组织（腱纵切）装片，骨骼肌（纵切）装片，心肌装片，平滑肌分离装片，运动神经元装片，血涂片。
实验步骤
观察上皮组织
（1）单层扁平上皮：由单层细胞构成，细胞连接紧密，细胞是扁平的，细胞边缘不规则，细胞内有圆形的核。
（2）复层扁平上皮：由多层细胞构成。
2. 观察结缔组织
（1）疏松结缔组织：是一种比较稀疏而松软的组织，包含多种细胞（主要为成纤维细胞和巨噬细胞）和三种纤维。成纤维细胞扁而大，呈多突起状，核大色浅。巨噬细胞形状不一，核较小色深。纤维包括胶原纤维、弹性纤维和网状纤维。胶原纤维成束状，较粗，弹性纤维呈黑细的直线或波纹状。
（2）致密结缔组织：由密集的胶原纤维和丰富的成纤维细胞构成，弹性纤维和无定形基质甚少。
（3）血细胞的观察：血液是由血细胞和液态的基质组成的，在血管中流遍全身。
血涂片是经瑞式染料染色，瑞式染料由碱性美蓝和酸性的伊红钠盐混合而成，当染料溶于甲醇后，即发生解离，分成了酸性和碱性染料。染色时，细胞中的嗜酸性物质即与酸性伊红结合而染成红色，嗜碱性物质与碱性美蓝结合而染成蓝色，嗜中性物质同时与酸碱两种染料结合而成红蓝混合的紫色。
观察肌肉组织
（1）横纹肌：细胞呈圆柱形，细胞核多，在光学显微镜下可见明暗交替的横纹。
（2）平滑肌：细胞呈梭形，细胞核为椭圆形，位于细胞中央。
（3）心肌：细胞呈短柱状，有分支，并相互连接成网，单核，心肌也有横纹。
平滑肌纵切平滑肌横切
骨骼肌纵切
心肌纵切心肌横切
4. 观察神经组织
（1）运动神经元：包括胞体和突起两部分，突起分为树突和轴突。
运动神经元装片
作业
请叙述你所观察到的四种组织的形态特征，联系其功能进行讨论；
作图：单层扁平上皮组织，疏松结缔组织，平滑肌，运动神经元；
观察血涂片，描述你在显微镜下观察到的各种血细胞；
完成实验报告。